產(chǎn)品英文名稱:HY Stemcell CCGmHuM TM Human MSCs Growth Medium 產(chǎn)品中文名稱:人間充質(zhì)干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基 CCGmHuM 人間充質(zhì)干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基根據(jù)干細(xì)胞的生長(zhǎng)需要,培養(yǎng)基包含必需和非必需氨基酸、維生素、有機(jī)和無(wú)機(jī)化合物、激素、生長(zhǎng)因子、微量礦物質(zhì)、血清替代物以 及其他補(bǔ)給成分。非常適用于培養(yǎng)哺乳類干細(xì)胞,包括臍帶干細(xì)胞,骨髓干細(xì)胞,脂肪干細(xì)胞等 間充質(zhì)干細(xì)胞。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,無(wú)病毒和支原體,性能穩(wěn)定,使用 該培養(yǎng)基能使干細(xì)胞在理想營(yíng)養(yǎng)平衡狀態(tài)下進(jìn)行多代擴(kuò)增而不發(fā)生分化(至少10代以內(nèi))。 人間充質(zhì)干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基產(chǎn)品特點(diǎn): 1.Chemically-Defined 2. Serum-Free 3. Xeno-Free 4.No Plate Coating Necessary 5.Perform Better than FBS Medium HY Stemcell CCGmHuM TM Human MSCs Growth Medium人間充質(zhì)干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基實(shí)驗(yàn)操作手冊(cè): 1. 材料和試劑準(zhǔn)備 耗材:細(xì)胞培養(yǎng)瓶 corning cellbind flask 25cm2 flask:corning 3289 75cm2 flask:corning 3290 175cm2 flask:corning 3292 試劑:原代人間充質(zhì)干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基CCGmHuM Medium( HZ0201M): Basal medium(HZ0202M ,450ml)+Supplement(HZ0203M,50ml)+Adherent factor(HZ0205M ,25X) *培養(yǎng)基配制:將Supplement在4℃溶解,溶解后將50ml溶液全部加入450ml Basal medium中;原代培養(yǎng)時(shí)需加入1X 的Adherent factor(Adherent factor:*培養(yǎng)基的體積比為1:24比例配制)。 傳代用人間充質(zhì)干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基CCGmHuM Medium( HZ0201M): Basal medium(HZ0202M ,450ml)+Supplement(HZ0203M ,50ml) *培養(yǎng)基配制:將Supplement在4℃溶解,溶解后將50ml溶液全部加入450ml Basal medium中。 細(xì)胞分離試劑: TrypLE™ Select CTS™(Gibco-A12859-01,100ml) 2. 方法 原代培養(yǎng)(臍帶來(lái)源的MSC) 1.1 制備組織細(xì)胞團(tuán):用手術(shù)器械剝離臍帶血管獲得華通氏膠體,洗凈血細(xì)胞,制備成1-4mm3組織小團(tuán)塊。 1.2 接種:將組織細(xì)胞團(tuán)塊按5-10mg/cm2均勻接種至細(xì)胞培養(yǎng)瓶中。 1.3 細(xì)胞維持:實(shí)時(shí)觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況,適當(dāng)換液,待原代細(xì)胞形成的克隆達(dá)到約100個(gè)細(xì)胞時(shí),可以進(jìn)行細(xì)胞消化、細(xì)胞凍存或傳代培養(yǎng)。 我們推薦細(xì)胞3-4天換液,原代培養(yǎng)時(shí)間大概為9-13天! 細(xì)胞傳代、擴(kuò)增培養(yǎng) 2.1細(xì)胞消化 待細(xì)胞匯合度約75%-80%左右時(shí)(9-13天左右),棄掉培養(yǎng)基,用DPBS(w/o Ca2+Mg2+)潤(rùn)洗一遍,加入適量的細(xì)胞分離液覆蓋細(xì)胞表面,37度,2-5min。待細(xì)胞開(kāi)始脫落時(shí),用適量的*培養(yǎng)基即刻終止消化,細(xì)胞離 心,300 g,8 min,棄去上清,用*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞沉淀。 2.2細(xì)胞傳代 按1.5-4*103/cm2接種到細(xì)胞培養(yǎng)瓶中,放入二氧化碳恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 我們推薦每3天左右進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng),判定傳代時(shí)間為細(xì)胞在培養(yǎng) 瓶中匯合度約為75%-80%,不能長(zhǎng)得過(guò)滿! 如果您在使用CCGmHuM TM Human MSCs Growth Medium 人間充質(zhì)干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基過(guò)程中,有任何技術(shù)問(wèn)題,我們開(kāi)通了HY STEMCELL技術(shù)團(tuán)隊(duì),歡迎您發(fā)郵件到pm@hystemcell.com 進(jìn)行交流溝通,我們的目標(biāo)是:推動(dòng)中國(guó)干細(xì)胞技術(shù)走向產(chǎn)業(yè)和臨床!
產(chǎn)品應(yīng)用領(lǐng)域:
適用于人及哺乳類來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞或成體干細(xì)胞的培養(yǎng),包括臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞、骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞及脂肪干細(xì)胞 |